空氣環境微生物檢測報告

摘要：

空氣是人類賴以生存的必須環境，也是微生物藉以擴散的媒介。空氣中存在着細菌、真菌、病毒、放線菌等多種微生物粒子，這些微生物粒子是空氣污染物的重要組成部分。而實驗室中的環境是更為重要的，對微生物的要求更加的高，一個好的實驗室環境可以讓實驗結果更加的精確。本實驗通過對實驗室空氣的採集，對微生物的`培養及染色觀察來證明證明實驗室環境存在微生物，也證明無菌操作的重要性。

正文：

前言

實驗室空氣微生物含量多少可以反映該實驗室的空氣質量，需要測定空氣中的微生物數量和空氣污染微生物。實驗室的空氣中微生物越少，代表在該實驗室做微生物實驗的時候誤差會小，成功率會高。本實驗以牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基培養實驗室中的微生物，利用革蘭氏染色法及顯微鏡觀察實驗室中空氣中的微生物種類及形態。

1.材料方法

1.1實驗材料

1.1.1樣品來源

實驗室空氣

1.1.2藥品

氫氧化鈉（固體），牛肉膏，蛋白腖，瓊脂粉，Nacl。

1.1.3耗材

培養基（牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基）無菌水，石棉網，電爐，酒精燈，培養皿，三角瓶，500ml燒杯，玻璃棒，超淨工作台，Ph試紙。

1.2方法

1.2.1取樣

採集實驗室空氣樣本

1.2.2製作培養基

在500ml燒杯內加水200毫升，放入牛肉膏1.0g、蛋白腖2.0g和氯化鈉1.0g，做記號，放在火上加熱，待燒杯內各組分溶解後，加入瓊脂4.0g，不斷攪拌以免粘底。停止加熱後冷卻，加入配置的NaOH溶液調節PH值至7.2-7.5後倒入三角瓶。

1.2.3高壓滅菌

將培養皿和三角瓶用報紙及繩包裝後，利用高壓滅菌鍋將培養皿和裝有培養液的三角瓶高壓滅菌，121度維持20分鐘.

1.2.4分裝培養液及加入樣本

在超淨工作台上將三角瓶中的培養液分裝到6個培養皿當中，等培養皿中培養液冷卻凝固，將其中三個加入實驗室中的空氣樣本，二個加入超淨工作台空氣，一個作為對照組。對照組A，實驗組B貼標籤做記號，倒置放入培養箱中培養。

1.2.5革蘭氏染色，觀察其種類，形態

將培養好的帶有微生物菌落的培養基拿出，取乾淨的載玻片於實驗台上，在載玻片中央滴一滴無菌蒸餾水，將接種環在火焰上燒紅，待冷卻後從斜面挑取少量菌種與玻片上的水滴混勻後，在載玻片上塗布成一均勻的薄層，塗布面不宜過大。利用高温，手持載玻片的一端，標本向上，在酒精燈火焰外層儘快的來回通過2~3次，共約2~3秒鐘，放置待冷後，進行染色。初染：用結晶紫染色1m(轉載於::空氣微生物)in後水洗，吸乾。媒染：加碘液1min後水洗，吸乾。脱色：用脱色液（95%乙醇）脱色30s，水洗，吸乾。復染：用番紅復染3min，水洗，吸乾。待標本片幹後置顯微鏡下，用低倍鏡觀察，發現目標物後用油鏡觀察，注意細菌細胞的顏色。

2.結果與分析

2.1實驗結果

2.2分析

此次實驗實驗目的基本完成，但仍存在一些誤差。本實驗採取1個培養基無菌作為對照組，另外5個作為實驗組，3個採用實驗室空氣，2個採用超淨工作台空氣（1）5個實驗組中，有一個培養皿沒有生長出細菌，由於倒培養基操作時培養液傾倒過少，導致無法滿足細菌生長代謝繁殖的所需能量。（2）如圖四，是培養皿中長出的細菌，經查詢，此細菌為呼吸道內的雜菌，由於操作時操作者不慎咳嗽將菌注入培養皿中。（3）如圖6使用革蘭氏染色法，但鏡下觀察有重疊現象，製片時為徹底打散細菌。

3.討論

本實驗除了略微操作失誤以外，其他良好，經討論，我們認為無菌操作時十分重要的，本實驗操作簡單，步驟清晰，答題沒有改動的地方，但在其中一個操作過程中，把培養皿直接放在教室中和超淨工作台上是不可取的，導致上述分析中的

（2）失誤。我們應該更加註重無菌操作。

3.參考文獻

[1]．《公共場所空氣的微生物檢測報告》孫豔萍

[2].《圖書館內外空氣微生物檢測及資源保護》王伯秋

[3].《基礎生物學實驗技術》主編：陳永富哈爾濱工程大學出版社2009